龙牡壮骨冲剂对小鼠胃肠动力及组织胃动素的影响

杨  磊，罗燕军

（湖北省妇女儿童医院，湖北武汉430070）

【摘要】目的 通过动物实验观察龙牡壮骨冲剂对小鼠胃肠动力及组织胃动素的影响，以探讨该药对胃肠动力的影响  及机制。方法将小鼠随机分为对照组、模型组、龙牡壮骨冲剂大、中、小剂量组，用不同药剂复制胃肠动力紊乱模型，以营养  性半固体糊灌胃，标记胃肠测量胃残留率和小肠推进比，同时以放免法测胃动素（MTL）水平。结果 龙牡壮骨冲剂对正常组  小鼠胃残留率和小肠推进比无影响，对胃复安所致胃排空加速、阿托品所致胃排空减慢、新斯的明所致小肠推进比增加、肾  上腺素所致小肠推进比降低有逆转作用（均为 P<0.05）， 与剂量有一定的相关性。结论 龙牡壮骨颗粒可双向调节胃肠运动， 并具有剂量依赖性，其对胃肠动力的调节作用可能是通过影响局部组织中的胃动素水平实现的。

【关键词】胃肠动力；龙牡壮骨冲剂；胃动素；小鼠

【中图分类号】 R57                               【文献标识码】 A                  【文章编号】1673-5552[2007]07-1-03

Influence of Long Mu Zhuang Gu Powder on Gastrointestinal Function in Experiment Animals

YANG Lei,LU Yan-jun

（Hubei Maternal and Children Hospital,Pediatric Department,Hubei Wuhan,430070）

【ABSTRACT】Objective To observe the influence of Longmuzhuanggu powder （LMZGP）on gastroenteric movement and  the  level  of  motilin（MTL）in  mice.Methods   Mice were randomly divided into control group,model group,LMZGP large dose group,LMZGP middle dose group,LMZGP low dose group.After establish the disorder of gastric depletion and small intestine advancement  by  using  maxolon,atropine,neostigmine  and  adrenaline,Gastric  emptying  and  intestinal  propagation  rates  were tested with black nutritional  semi  solid  cataplasm  ,and  the  expression  of motilin  was  tested  by  radio-immuno-asay.Results LMZGP administrated orally had no significant influence on the gastric depletion and small intestine advancement in normal mice, but improved the gastroenteric movement in animal model of gastroenteric movement disorders which manifested as relieving gastric depletion disorder by atropine and maxolon,antagonizing significantly the acceleration or lower of small intestine induced by neostigmine and adrenaline （P<0.05）。LMZGP also dose-dependently antagonized the disorders of MTL.

Concluslon  LMZGP have dual-directional regulating effect on gastric depletion and intestine propagation via a mechanism of action mainly on MTL in gastroenteric tisue.

【KEY WORDS】gastroenteric movement;Longmuzhuanggu powder,motilin（MTL）;mouse

小儿胃肠动力性疾病十分常见，占儿科胃肠门诊的2/3,现在临床治疗手段有限，且副作用相对较大，随着对祖国  医学研究的深入，发现小儿胃肠动力性疾病常和脾虚相关。 龙牡壮骨冲剂是我省中成药大品种，应用于临床多年，主要  用于治疗和预防小儿佝偻病、软骨病、临床上还有健脾、和  胃的功效。目前其对胃肠动力的影响尚未见报道。本研究目的就在于了解龙牡壮骨颗粒对胃肠动力的影响，以利于龙  牡壮骨颗粒二次开发利用。

1  对象与方法

1.1   研究对象雄性昆明种小鼠，平均18——20g（4——6wk），  雌 雄兼用，购自湖北省医学科学院实验动物中心。

1.2 实验试剂放免法测胃动素，放免试剂盒购自北京华英 生物技术研究所。龙牡壮骨冲剂为武汉健民药业集团生产；

1.3   仪器 OHAUS PT 200S 电子天平，美国出品；Labofug 400R 离心机，德国Heraeus 公司产品。

14试验方法1]:

1 . 4 . 1营养性半固体糊制作口取5g羧甲基纤维素溶于25ml蒸馏水中，然后分别加入8g 奶粉、4g 糖、4g 淀粉，3g 活性 炭，搅拌均匀，配成150ml约150g的半固体糊，置冰箱中冷 藏12h, 使用前2h 取出恢复常温。

1.4.2 龙牡壮骨冲剂对正常小鼠胃排空及小肠推进的影响 昆明种小鼠40只，按体重随机分成4组，为对照组（蒸馏水 灌胃）、龙牡壮骨冲剂大、中、小剂量组（药剂量分别为6.3g/ kg、3.2g/kg、1.6g/kg,灌胃），给药75min 后给予营养性半固 体糊1ml/只，30min后脱颈处死动物，剖开腹腔，结扎胃贲门 和幽门。取胃用滤纸试干后称全重，然后沿胃大弯剪开胃 体，洗去胃内容物后用滤纸试干，称胃净重，胃全重和胃净 重差值为胃内残留物重，以之与所给糊重的百分比为胃内 残留率，胃内残留率=（全重-净重）y糊重×100%。自盲肠处取 上述小鼠的肠，不加牵引铺平于白纸上，分别量取自幽门括 约肌至炭糊最前端及至盲肠的距离。计算小肠推进比（%）= （炭糊移动距离/幽-盲全长）×100%。

14.3 龙牡壮骨冲剂对胃复安所致小鼠胃排空的影响 昆明种小鼠40只，按体重随机分成4组，为模型组、龙牡壮骨剂大、中、小剂量组（剂量同上，灌胃），模型组小鼠蒸馏水灌 胃，后3组小鼠给予相应剂量龙牡壮骨冲剂，60min 后各组 小鼠均给予胃复安5mg/kg 尾静脉注射。15min 后给予营养 性半固体糊1ml/只，其余步骤同4.2,计算胃内残留率。

1.4.4 龙牡壮骨冲剂对阿托品所致胃排空的影响昆明种小 鼠40只，按体重随机分成4组，为模型组、龙牡壮骨冲剂 大、中、小剂量组（剂量同上，灌胃），模型组小鼠蒸馏水灌 胃，后3组小鼠给予相应剂量龙牡壮骨冲剂，60min 后各组 小鼠均给予阿托品15mg/kg 尾静脉注射。15min 后给予营养 性半固体糊1ml/只，其余步骤同4.2,计算胃内残留率。

1.4.5 龙牡壮骨冲剂对新斯的明所致小鼠小肠推进的影响 昆明种小鼠40只，按体重随机分成4组，为模型组、龙牡壮 骨冲剂大、中、小剂量组（剂量同上，灌胃），模型组小鼠蒸馏 水灌胃，后3组小鼠给予相应剂量龙牡壮骨冲剂，60min后 各组小鼠均给予新斯的明0.08mg/kg尾静脉注射。15min 后 给予营养性半固体糊1ml/只，其余步骤同4.2,计算小肠推 进比（%）。

1.4.6 龙牡壮骨冲剂对肾上腺素负荷小肠推进的影 响 昆 明 种小鼠40只，按体重随机分成4组，为模型组、龙牡壮骨冲 剂大、中、小剂量组（剂量同上，灌胃），模型组小鼠蒸馏水灌 胃，后3组小鼠给予相应剂量龙牡壮骨冲剂，60min 后各组 小鼠均给予肾上腺素0.4mg/kg 尾静脉注射。15min 后给予营  养性半固体糊1ml/只，其余步骤同4.2,计算小肠推进比（%）。

1.4.7    龙牡壮骨颗粒对小鼠胃动素 （MTL）    的 影 响 小 鼠 处 死、开腹，取胃组织及肠组织，洗去胃肠内容物后称重量，于 1ml100℃ 生理盐水中煮沸3min, 加 入 1N 冰醋酸0.5ml中 于 匀浆器中匀浆提取，加入1N 的 NaOH  0.5ml中和，4℃条件 下，离心（3500r/min）30min,  取上清液，-20℃下保存。本试验 采用放射免疫分析非平衡法进行测定。

1.5   统计学处理 数据用均数加减标准差表示（zs），   统计方 法采用方差分析，由 SPSS   13.0统计软件处理。

2 结果

2.1 龙牡壮骨颗粒对小鼠臂排空的影响见表1。

表1            胃残留率（%）

	n	正常小鼠	胃复安组	阿托品组
对照组	10	49.2±8.1	49.2±8.1	49.2±8.1
模型组	10	-	32.3±9.0°	26.7±5.3°
龙牡壮骨冲剂（大剂量组）	10	45.8±8.6	48.4±7.2	48.4±14.2
龙牡壮骨冲剂（中剂量组）	10	40.1±12.8	40.8±6.6	42.7±10.3
龙牡壮骨冲剂（小剂量组）	10	44.7±15.3	36.5±4.9	35.3±9.5

与对照组相比较，P<0.05; 与同列模型组比较，bP<0.05。

2.2 龙牡壮骨颗粒对小服小肠推进的影响见表2。

表 2 小 肠 推 进 比 （ % ）

	n  正常小鼠	新斯的明组	肾上腺素组
对照组	1065.8±9.3	65.8±9.3	65.8±9.3
模型组	10      -	79.7±6.8°	46.6±8.6°
龙牡壮骨冲剂（大剂量组）	1068.3±10.3	68.4±11.3	59.2±8.0
龙牡壮骨冲剂（中剂量组）	1066.5±8.4	69.2±13.1	57.8±7.4
龙牡壮骨冲剂（小剂量组）	1063.3±8.5	73.2±7.5°	54.7±5.8°

与正常组相比较，P<0.05;     与同列模型组比较， bP<

0.05.

2.3 龙牡壮骨颗粒对小鼠胃肠组织臂动素的影响见表3.

3 讨论

胃肠运动的调节机制非常复杂，包括中枢神经系统、肠 神经系统的作用及众多神经递质及神经调节物的调节，目  前尚无一理想的造模方法，其实验对照组的设定可分为2 类：一为空白对照组，二为给予某一神经节阻断剂或拟似剂， 达到减弱或增强胃动力的目的3。本研究用胃复安、阿托品、 新斯的明、肾上腺素注射液尾静脉注射复制胃肠动力紊乱  小鼠模型，结果提示胃复安可致胃排空加速，阿托品可致胃 排空减慢，新斯的明可致小肠推进比增加，肾上腺素可致小  肠推进比降低，提示造模成功。本实验以胃内残留率及小肠  推进比为指标，采用营养性半固体糊为食物，其营养结构更  接近动物日常食物，因此能更客观、准确地反映动物胃排空  状况及药物的影响口。

本研究发现，龙牡壮骨冲剂对正常小鼠胃排空和小肠 推进比无影响，但对胃复安所致胃排空加速、阿托品所致胃 排空减慢、新斯的明所致小肠推进比增加、肾上腺素所致小 肠推进比降低有逆转作用，且从量效关系看随剂量增大作 用明显。大剂量（6.3g/kg）龙牡壮骨冲剂多能使胃肠功能紊 乱得到纠正，中小剂量龙牡壮骨冲剂即使对胃肠功能紊乱 不能完全纠正，但仍有一定的作用。龙牡壮骨冲剂对于胃肠 运动的这种双向调节作用是其治疗胃肠动力紊乱的药效学 基础，说明本方在胃肠运动偏抑或偏亢机能状态下具有双 向调节作用，符合目前中医理论的新学说“霰弹学说”阳，即 该中药复方作用于多靶体，有别于西药单体制剂，作用于单 靶体机制，可起到双向调节作用，体现了中药药理作用的优 势 。

胃动素（motilin,MTL） 影响胃肠道运动的主要机制是激 发消化期间综合肌电活动（migrating motor complex,MMC）相 而促进胃肠收缩及小肠的分节运动15.6,该运动可周期性产 生，并向小肠远端传播，从而加速了小肠传递时间，同时增 加结肠的运动，其生理意义是对胃肠腔的内容物起着一种 清扫作用。胃动素异常释放与许多疾病关系密切，如消化性溃疡、功能性消化不良等。

表3龙牡壮骨颗粒对小鼠胃肠组织胃动素的影响（pg/100mg）

	n	正常小鼠	胃复安组	阿托品组	新斯的明组	肾上腺素组
对照组	10	152.4±19.6	152.4±19.6	152.4±19.6	152.4±19.6	152.4±19.6
模型组	10	-	223.3±18.5°	94.4±17.7°	199.3±26.1	95.9±29.8a
龙牡壮骨冲剂（大剂量组）	10	147.9±17.7	161.0±18.4	148.5±16.4	154.2±17.3	167.0±21.5
龙牡壮骨冲剂（中剂量组）	10	162.1±23.1	177.3±21.6	125.0±18.7	173.0±15.8	146.5±14.0
龙牡壮骨冲剂（小剂量组）	10	155.4±19.2	193.1±17.9	139.7±20.3	180.5±19.4	109.5±23.1*

与正常组相比较，P<0.05;与同列模型组比较，P<0.05。

本研究发现，胃复安导致小鼠胃排空加速同时可致胃 肠组织中胃动素升高；阿托品所致胃排空减慢同时可致胃 肠组织中胃动素降低；新斯的明可致小肠推进比增加的同 时可致胃肠组织中胃动素升高；肾上腺素可致小肠推进比 降低的同时致胃肠组织中胃动素降低。提示胃肠功能紊乱 与胃肠组织局部胃动素含量相关，胃肠道局部胃动素含量 的改变可能是胃肠道运动异常的神经生物学基础。龙牡壮 骨颗粒可改变胃肠动力紊乱模型小鼠胃肠组织中胃动素的 含量，且与剂量有一定的相关性。而胃动素的释放主要是由 毒草碱机制所调节，刺激迷走神经可使其释放增加，提示本 方促进胃动素的释放可能通过刺激迷走神经胆碱能通路这 一机制而实现的。这对进一步认识脾虚胃肠动力紊乱的病 理学基础及龙牡壮骨颗粒的药理作用机制具有重要意义。

参考文献

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《中国医药前沿》2007年7月第2卷第14期

9-2007-龙牡壮骨冲剂对小鼠胃肠动力及组织胃动素的影响_杨磊。pdf